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coloration de Ziehl Neelsen

La coloration de zieh Neelsen:
Permet l'identification microscopique des mycobactéries.
elle met en évidence l'acido-alcooo-résistance : caractère fondamental des mycobactéries.
Ce type de coloration  comporte trois temps:
 1er temps : Application d'un colorant énergique: la fuchsine à chaud: 
- Recouvrir  le frottis d de fuchsine de Ziehl 
- Le Chauffer jusqu’à  à émission de vapeur pendant 10 minutes , Le colorant ne doit pas bouillir ou se dessécher sur la lame; en ajouter si nécessaire
 - Rincer  à l'eau distillée 
2ème temps : Décolorations successives par un acide fort et alcool90°: 
 -Décolorer avec la solution acido-alcoole jusquà décoloration de la lame , cette étape est importante , la durée de la décoloration dépend de l’épaisseur du frottis
-Rincer à l’eau
3ème temps: Contre coloration au bleu de Méthylène 
-Recouvrir  la lame pendant deux minutes d'une solution de bleu de méthylène 
-Rincer.
4ème temps: Observation au microscope optique à l'immersion les Bacilles de Koch apparaissent roses sur fond bleu.
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